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細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí)|懸浮細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)室里培養(yǎng)的細(xì)胞一般可以簡單地分為兩大類,貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。貼壁細(xì)胞(adherent cells)指的是這類生長必須有可以貼附的支持物表面,只有依靠自身分泌的或培養(yǎng)基中提供的貼附因子才能在該表面上生長、繁殖的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞在該表面生長后,一般會(huì)形成兩種形態(tài),即成纖維樣細(xì)胞或者上皮樣細(xì)胞。而另一類則是細(xì)胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,這類細(xì)胞我們稱之為懸浮細(xì)胞。懸浮細(xì)胞在顯微鏡下觀察,一般是單個(gè)生長的大小均一的圓圓的、亮亮的形態(tài)規(guī)則的細(xì)
2023.08.01
TLC薄層點(diǎn)板常見問題與解決辦法
1、點(diǎn)樣是成功分離的關(guān)鍵,怎樣提高點(diǎn)樣效率?(1)點(diǎn)樣圓點(diǎn)小而圓,直徑盡量不要超過2mm;(2)在便于顯色的前提下,點(diǎn)樣量盡量少,同時(shí)就要注意點(diǎn)樣液體的濃度,防止過載拖尾;(3)點(diǎn)樣勿上薄層表面;(4)點(diǎn)樣圓點(diǎn)盡量遠(yuǎn)離薄層邊緣,至少相隔3mm,減少邊緣效應(yīng);(5)所有點(diǎn)樣點(diǎn)盡量保持在一條與底邊平行的直線上,務(wù)必點(diǎn)交叉點(diǎn);(6)點(diǎn)樣完成后,溶劑用吹風(fēng)機(jī)盡量吹干。2、兩個(gè)點(diǎn)離的太近怎么辦?(1)在展開劑中多次展多次;(2)增加展開劑的極性;(3)選擇不同體系的
2023.08.01
AS8900四合一氣體檢測儀校準(zhǔn)方法
警告:沒有標(biāo)準(zhǔn)濃度氣體裝置,請勿隨意進(jìn)入校準(zhǔn)頁面,一旦進(jìn)入校準(zhǔn)頁面儀器的數(shù)值就被更改,切記!一、儀器校準(zhǔn)模式AS8900四合一氣體檢測儀最后一個(gè)設(shè)置頁面是調(diào)零和標(biāo)定模式頁面。只有在進(jìn)入設(shè)置模式時(shí),用戶輸入正確的安全密碼后,方可進(jìn)入設(shè)置頁面,此時(shí)用戶可對儀器進(jìn)行調(diào)零和標(biāo)定。二、儀器校準(zhǔn)儀器具有快速校準(zhǔn)功能,只要使用一個(gè)含有混合氣體的氣瓶就可同時(shí)給所有傳感器校準(zhǔn)。使用快速校準(zhǔn)功能,可一次性完成儀器的校準(zhǔn)。您即可以單獨(dú)給儀器校準(zhǔn),也可以將其連接在采樣泵上進(jìn)行校準(zhǔn)
2023.07.26
藻類培養(yǎng)基——植物組織培養(yǎng)
藻類培養(yǎng)基可由濃縮溶液或粉末鹽混合物制備而成。濃縮溶液組分較完整,包含維生素,應(yīng)冷凍保存。而粉末培養(yǎng)基則可以靈活地自定義培養(yǎng)基的最終組分。這類用于制備水生物種生長培養(yǎng)基的粉末由“富集”鹽混合物和完全合成培養(yǎng)基的鹽混合物組成。將粉末或濃縮溶液分別加入淡水或海水中以制備富含淡水或海水的培養(yǎng)基。為了制備合成海生生長培養(yǎng)基,將粉末添加到組織培養(yǎng)級淡水中。已公布的水生物種生長培養(yǎng)基配方通常含有碳酸氫鈉。我們的粉末混合物中不包含碳酸氫鈉,應(yīng)視需要添加在培養(yǎng)基中。從包裝
2023.07.21
細(xì)胞生長緩慢的原因解析
一、培養(yǎng)體系問題1、檢查細(xì)胞是否存在污染。(1)如果培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)未添加抗生素,細(xì)胞污染則是不可避免的。①用肉眼和顯微鏡進(jìn)行檢查。②如果細(xì)胞被污染則要棄掉。(2)支原體污染不易察覺,因此需要進(jìn)行定期檢測。(3)檢查可能造成污染的途徑和原因。2、檢查用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基和血清(例如批次廠商是否相同)。3、如果排除問題與培養(yǎng)基無關(guān),那么可能還是細(xì)胞存在問題。(1)復(fù)蘇另一支凍存的細(xì)胞,與正在培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行比較。但是需要注意的是兩種細(xì)胞的培養(yǎng)應(yīng)分開,以免在培養(yǎng)之初就
2023.07.11
土壤酶測試需要用鮮土還是風(fēng)干土
目前,對于土壤酶活的測定取樣是用鮮土還是風(fēng)干土,還存在一定的爭議。早期的土壤酶學(xué)研究多用鮮土進(jìn)行測定,認(rèn)為風(fēng)干樣本酶活性的測定結(jié)果常常偏低,所以一般推薦新鮮土樣測定酶活性,測定的結(jié)果能代表自然狀態(tài)下的酶活性狀況,然而,實(shí)際工作中,用新鮮土樣分析,受到許多條件的限制。比如采樣與測定的時(shí)間間隔時(shí)間難于把握、鮮土濕度過時(shí),過篩有一定難度,還有土壤中的其他侵入體分離問題等。風(fēng)干土更容易儲(chǔ)存和處理,使用風(fēng)干土壤通常也會(huì)使得重復(fù)之間的差異更小,并使更容易回到原始土壤樣
2023.07.04
生化試劑盒——植物組織樣本的前處理
一、勻漿一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4磷酸鹽緩沖液(PBS),客戶可根據(jù)樣本及測定指標(biāo)的情況自行設(shè)定濃度,目的是保持樣本的等滲環(huán)境。二、制備1、取組織塊(0.2g~0.5g)最少可到5~10mg在冰冷的PBS中漂洗,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入5ml的勻漿管中。2、按重量(g):體積(ml)=1:4的比例加入4倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。3、勻漿的方式:手工勻漿,機(jī)器勻漿。①手工勻漿:左手
2023.07.04
產(chǎn)品說明書|固相萃取固定化親和色譜微球
英文名稱:SPE-Ti-IMAC, 100%中文名稱:固相萃取固定化親和色譜微球保存條件:室溫儲(chǔ)存,保質(zhì)期為五年。適用范圍:本產(chǎn)品適用于對磷酸肽的鑒定和富集。自備材料:•樣品:蛋白酶解液注意:蛋白酶解液中不能含有干擾磷酸肽富集的物質(zhì),如 EDTA等絡(luò)合劑、含磷酸根的緩沖鹽!•Loading buffer:80%ACN / 6%TFA水溶液作用:將酶解液酸化,高濃度的 TFA-可以抑制酸性肽段的殘留•Wash buffer
2022.12.07
蛋白質(zhì)印跡——膜選擇
PVDF膜和NC膜作為Western印跡應(yīng)用中最常用的兩種類型的膜,各有什么特點(diǎn)?我們該如何選擇?印跡所使用的膜的類型可能影響下列因素:•蛋白質(zhì)結(jié)合能力•是否需要用醇預(yù)濕•開展多次剝離(stripping)和再生檢測(reprobing)實(shí)驗(yàn)的能力•蛋白質(zhì)觀察•長期印跡保存•信噪比聚偏二氟乙烯(PVDF)和硝酸纖維素是Western印跡應(yīng)用中最常用的兩種類型的膜。與硝酸纖維素膜相比,電
2022.11.29
FLAG® 抗體結(jié)合特性
抗體 &結(jié)合特性ANTI-FLAG M1小鼠IgG2b MAbANTI-FLAG M2小鼠IgG1 MAbANTI-FLAG M5小鼠IgG1 MAb未加工的N-端FLAG融合蛋白: 信號肽 - FLAG -蛋白-+未確定Met-N-端FLAG融合蛋白: Met - FLAG -蛋白-+++N-端FLAG融合蛋白: FLAG -蛋白++弱內(nèi)部 FLAG肽: 蛋白 - FLAG -蛋白-+未確定C-端FLAG融合蛋白: 蛋白 - FLAG-+弱鈣依賴
2022.11.29

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